如何组装 F 和 R 对 Sanger 序列?

Geneious de novo 组装器可用于对齐成对的正向和反向 Sanger 序列以创建单个一致序列。  这可以使用序列名称来引导程序集批量完成。 

首先,使用 Annotate 和 Predict - Trim Ends从您的读数中修剪质量较差的序列。  错误概率限制设置为 0.05 以修剪质量得分小于大约 13 的碱基。  注释修剪的区域,以便您可以看到已修剪的内容并根据需要进行调整。  

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修剪后保存更改。 

接下来,转到对齐/组装 - 从头组装以打开从头组装选项。  选择按名称组装选项,然后选择在 F 和 R 对之间相同的序列名称部分,加上将这部分与名称的非相同部分分开的符号。  

例如,对于这个 F 和 R 对列表,名称的相同部分(aru2、aru3 等)是第一部分,F 和 R 标识符用下划线分隔。

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因此,从头组装设置应为“按名称的第一部分组装,以 _(下划线)分隔”。

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这将为每对生成一个重叠群文档,如下所示。

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在从头组装过程中,通过在从头组装设置窗口中选择保存一致序列选项,或在生成重叠群并进行目视检查后,可以生成每对读取的一致序列。  要从重叠群组装文档生成一致序列,请选择所有组装并转到工具 > 生成一致序列。 

 

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